Оухтерлоні (1962) дає загальний опис цих методів. Свердловини пробиті в агар або агарозний гель у визначеному геометричному розташуванні. Зазвичай у тестах подвійної дифузії антисироватка знаходиться в центральній лунці, а розчини антигену тестуються в ряді лунок, що оточують центральну лунку.

Процедура. Гелеву пластину розрізають, щоб утворити серію отворів («колодок») в агарі або агарозному гелі. Екстракт зразка, що представляє інтерес (наприклад, клітини людини, зібрані з тканини мигдалин), поміщають в одну лунку, сироватки або очищені антитіла поміщають в іншу лунку, а планшет залишають на 48 годин для прояву.

Він включає в себе розміщення зразків антигену в лунки, вирізані в агарозному гелі, що містять іммобілізовані антитіла. Через гель пропускають електричний струм, який змушує антигени мігрувати. Коли антигени взаємодіють з антитілами, утворюються лінії преципітину у формі конусів або «ракет».

Чутливість методу можна підвищити за допомогою попереднього концентрування досліджуваних зразків, дворазового чи кількох заповнень лунок або підкріплення шляхом розміщення відомих позитивних зразків у лунках поруч із досліджуваними зразками. Використання агарози замість агару також підвищує чутливість.

Імунодифузія — це техніка виявлення або вимірювання антитіл і антигенів шляхом їх преципітації, яка передбачає дифузію через таку речовину, як агар або агарозний гель.

Аналіз Ouchterlony демонструє утворення решітки в гелі. Радіальний імунодифузійний аналіз використовується для кількісного визначення антигену шляхом вимірювання розміру зони преципітації в гелі, наповненому антитілами. Нерозчинні антигени в суспензії утворюють флокулянти, зв’язуючись антитілами.