Таким чином, зразок білків, що проходить через колонку для гель-фільтрації, розділятиметься на основі молекулярного розміру: Великі елююються першими, а найменші – останніми (і білки «середнього» розміру будуть елююватися в середині).Sep 8, 2019

найбільші молекули Білки елююються з гель-фільтраційної колонки в порядку їх розміру, з найбільші молекули елююють першими, а найменші молекули елююють останніми. У гель-фільтраційній хроматографії кульки з крихітними тунелями використовуються для розділення білків. Розмір тунелю називається «лімітом виключення».

Малі молекули Малі молекули можуть увійти у весь внутрішньочастковий поровий простір і, отже, елююватися останніми, тоді як великі молекули виключаються з усіх пор і, отже, елююються першими.

Після того, як зразок потрапив у колонку, молекули, більші за пори не здатні дифундувати в кульки, тому вони елююються першими. Молекули, розмір яких коливається від дуже великого до дуже маленького, можуть різною мірою проникати в пори залежно від їх розміру.

Теоретично при будь-якому значенні pH, білки повинні елююватися в порядку їх чистого заряду, тобто на аніонообмінній колонці чистий негативно заряджений білок буде елююватися після позитивно зарядженого білка. Однак локалізовані концентровані області чистого негативного або позитивного заряду можуть впливати на порядок елюції.

Молекули елююються в порядку зменшення молекулярного розміру. Молекулярна маса найменшої молекули, яка не може проникнути в пори даного гелю, називається «межею виключення» гелю.